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當前位置：首頁 - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 克隆感受態(tài) -INVαF 感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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INVαF 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96138

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

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標簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

INVαF′大腸桿菌允許高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定復制；該菌株帶有 lacZ∆M15突變，可以進行藍/白篩選實驗；

該菌株同時帶有 recA 和 endA1 突變，可顯著降低質(zhì)粒的重組效率以及胞內(nèi)核酸酶的含量，從而提

高質(zhì)粒 DNA 的質(zhì)量。此外，該菌株還可以利用攜帶 F1 復制起點的載體來生產(chǎn) ssDNA。值得注意

的是，在進行藍白斑實驗時，無需添加 IPTG 誘導，只需要在平板上涂上 X-gal 即可。INVαF′感受

態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

INVαF′感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F′ endA1 recA1 hsdR17 (rK– , mK+) supE44 thi-1 gyrA96 relA1 φ80 lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)

U169 λ–

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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