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產(chǎn)品分類(lèi)：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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Tuner感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96141

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1053

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標(biāo)簽：感受態(tài)

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Tuner 系列菌株是 lacZY 刪除的 BL21 突變菌株，其中 lacY 的突變使得 IPTG 能夠進(jìn)入所有細(xì)胞的胞

內(nèi)，從而使得蛋白的誘導(dǎo)水平具有 IPTG 的濃度依賴(lài)性。當(dāng)與 pET 系列載體聯(lián)合使用時(shí)，可使蛋白

的表達(dá)量從低表達(dá)水平到超高表達(dá)水平的范圍內(nèi)進(jìn)行有效的調(diào)節(jié)；而在蛋白表達(dá)水平低的情況下，

目的蛋白可能會(huì)呈現(xiàn)更好的可溶性和活性。因此，Tuner系列菌株的蛋白表達(dá)水平可以通過(guò)IPTG濃

度來(lái)進(jìn)行精確而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼{(diào)控。此外，Tuner 系列菌株還是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。由于該

菌株不含有 λDE3序列，不表達(dá) T7 RNA 聚合酶，因此不能用于 T7啟動(dòng)子系列質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。經(jīng)

pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè)，Tuner 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Tuner

化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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