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熱線電話:021-52273538當(dāng)前位置:首頁 - 產(chǎn)品中心 - Nexell細(xì)胞系/株 - 人源細(xì)胞系 -HTR-8/Svneo 人胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞
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公司郵箱:yuchunbio@163.com
公司地址: 上海奉賢區(qū)環(huán)城東路323號(hào)8樓
產(chǎn)品貨號(hào):BH3507
產(chǎn)品規(guī)格:1x106
產(chǎn)品價(jià)格: ¥1800
點(diǎn)擊次數(shù):38
在線詢價(jià)細(xì)胞介紹
HTR-8/SVneo 細(xì)胞是通過用編碼猿病毒 40 大 T 抗原的基因轉(zhuǎn)染從人類妊娠早期胎盤絨毛外植體中生長出來的細(xì)胞而獲得的。這些細(xì)胞在原位表現(xiàn)出絨毛外侵襲性滋養(yǎng)層細(xì)胞的多種標(biāo)志物:胰島素樣生長因子 (IGF)-II、NDOG-5、增殖細(xì)胞核抗原 (PCNA)、人白細(xì)胞抗原框架抗原 (W6/32) 和一組獨(dú)特的整聯(lián)蛋白,包括 alpha 1、alpha 3、alpha 5、alpha v 和 beta 1 亞基以及 alpha v beta 3/beta 5 玻連蛋白受體。它們是負(fù)性巨噬細(xì)胞標(biāo)記 63/D3、內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記因子 VIII 以及 α6 和 β4 整合素亞基。HTR-8/SVneo 細(xì)胞可用于研究滋養(yǎng)層和胎盤生物學(xué)。
注意:該細(xì)胞系已被證明包含上皮細(xì)胞和間充質(zhì)樣細(xì)胞群。
細(xì)胞特性
1) 來源:妊娠 6 至 12 周 胎盤組織
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞和間充質(zhì)樣細(xì)胞群 貼壁生長
3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?/font>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1) 準(zhǔn)備1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5-10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
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