產(chǎn)品描述

“黑膠蟲”是一種常見的細(xì)胞污染物，與細(xì)胞競爭性生長，對細(xì)胞生長不利，嚴(yán)重時導(dǎo)致細(xì)胞死

亡。目前很多細(xì)胞存在被“黑膠蟲”污染的現(xiàn)象，對細(xì)胞培養(yǎng)及其后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成了極大地影響。 “黑膠蟲”污染的細(xì)胞常見的特性有以下幾點(diǎn)：

① 培養(yǎng)基不渾濁 ，在顯微鏡下觀察，細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有“小黑點(diǎn)”呈現(xiàn)布朗運(yùn)動 ，且隨著 培養(yǎng)時間的延長“小黑點(diǎn)”逐漸增多；

②“黑膠蟲”污染的細(xì)胞，營養(yǎng)消耗快，需要頻繁更換培養(yǎng)液；

③“黑膠蟲”污染的細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞狀態(tài)差，空泡化嚴(yán)重，甚至還可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變。 黑膠蟲清除劑用于清除細(xì)胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的“黑點(diǎn)”，只需1~3天就可以顯著抑制“黑點(diǎn)”生長，

一周左右即可清除“黑點(diǎn)”。

本產(chǎn)品經(jīng)過細(xì)胞庫數(shù)百種細(xì)胞的測試和長期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，對細(xì)胞生長無明顯影響，高效、特異性 清除“黑膠蟲” ，最大程度上挽救珍貴細(xì)胞。

質(zhì)量控制

1： 通過細(xì)菌、真菌、支原體、內(nèi)毒素檢測。

:2： 通過滲透壓、pH 檢測。

:3： 通過產(chǎn)品性能檢測。 運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸；

-20℃避光保存，保質(zhì)期2年；

使用方法

從-20℃冰箱內(nèi)取出黑膠蟲清除劑，將試劑管瞬時離心（3000rpm ，3~5s）后放置于EP管架上，用 75%的酒精噴灑試劑管的表面，在生物安全柜中進(jìn)行無菌操作；
 以T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶為例

對于黑膠蟲污染的細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量黑膠蟲清除劑，通常推薦使用的稀釋倍數(shù)為 2000×,  如：6mL的細(xì)胞培養(yǎng)基加入3μL的黑膠蟲清除劑混勻。連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周即可有效清除黑膠 蟲污染。

若黑膠蟲污染較嚴(yán)重，可酌情增加藥物濃度以提高清除黑膠蟲的效率 ，推薦嘗試最小稀釋倍數(shù)  、   中間稀釋倍數(shù)  、最大稀釋倍數(shù)三個濃度進(jìn)行測試。以細(xì)胞系（成纖維樣）為例，建議將細(xì)胞分為三份， 分別采用500×、 1000×、2000×三個濃度進(jìn)行黑膠蟲清除，若500×對細(xì)胞生長無明顯影響，建議采用    500×清除黑膠蟲，若500×對細(xì)胞生長有明顯影響，則采用1000×清除黑膠蟲 ，連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周即可   有效去除黑膠蟲污染。

注意：可參考下表選擇稀釋倍數(shù)，達(dá)到最佳清除效果。

 特別提醒

①使用本試劑前請仔細(xì)閱讀說明書；

②本產(chǎn)品經(jīng)0.1μm 過濾除菌，使用本產(chǎn)品時無需過濾，可直接加入培養(yǎng)基使用；

③本試劑具有專利技術(shù)，-20℃保存時不凍結(jié)，使用時無需解凍，從-20℃取出即可使用；

④為了發(fā)揮最好的藥效，含藥培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用，如果加藥培養(yǎng)基未用完，于4℃冰箱中避光保 存，2周內(nèi)用完，使用培養(yǎng)基前需預(yù)熱至37℃;

⑤貼壁細(xì)胞換液或傳代前 ，棄去舊的培養(yǎng)基 ，用含1000×黑膠蟲清除劑的PBS輕輕沖洗細(xì)胞表面2 次。懸浮細(xì)胞、貼壁不牢的細(xì)胞、半貼半懸細(xì)胞換液或傳代前 ，可利用黑膠蟲直徑遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑的 特點(diǎn)，采用150g（或900rpm）低速離心5mins ，棄去舊的培養(yǎng)基，再用含1000×黑膠蟲清除劑的PBS輕 輕沖洗細(xì)胞2次；

 

⑥用含藥PBS清洗細(xì)胞后，加入含有黑膠蟲清除試劑的新鮮完全培養(yǎng)基（傳代后鋪細(xì)胞需更換為新 的瓶/板）， 1天換液1次 ， 連續(xù)加藥4~7天 ，或者2天換液1次，連續(xù)加藥7~14天 ，若黑膠蟲污染非常嚴(yán) 重時，需增加換液頻率和延長處理時間；

⑦細(xì)胞老化或狀態(tài)異常時會產(chǎn)生黑色的細(xì)胞分泌物，此種分泌物會隨著細(xì)胞培養(yǎng)不斷產(chǎn)生， 并不 是“黑膠蟲”，無法通過黑膠蟲清除劑有效去除；

⑧如遇個別細(xì)胞對本試劑敏感，細(xì)胞生長速度明顯受影響時，建議減量使用或進(jìn)行稀釋度測試；

⑨黑膠蟲清除劑處理后，會有很好的清除黑膠蟲效果，但是如果環(huán)境或使用試劑中仍有污染源存 在，細(xì)胞可能會再次污染，因此需做好適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施；

⑩加入本產(chǎn)品進(jìn)行黑膠蟲預(yù)防和清除時，無需添加雙抗（青霉素-鏈霉素）；

⑪為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

⑫本產(chǎn)品僅供研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不得用于診斷或治療。