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當(dāng)前位置：首頁 - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 表達感受態(tài) -Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產(chǎn)品展示

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Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96120

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1351

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標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的優(yōu)點；Rosetta-gami 2

(DE3)系列菌株是來源于 Origami 2 系列菌株，在其染色體上帶有溶源性的 λDE3，可表達 T7 RNA

聚合酶。由于該菌株不含卡納抗性，適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動子系列載體。該菌株攜帶

有 trxB 和 gor 基因突變，從而提高了含二硫鍵正確折疊蛋白的表達效率；同時帶有的 pLacIRARE2

質(zhì)粒（攜帶氯霉素抗性），除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA, AGG, AGA, CUA,

CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個稀有密碼子 CGG 的 tRNA，因而能夠增

強真核細(xì)胞蛋白在大腸桿菌中的表達水平。此外，LacI 蛋白也可以抑制 T7lac 啟動子在無誘導(dǎo)劑時

的本底表達。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達 107

cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI

化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10

trxB pLacIRARE2 (CamR, StrR, TetR)

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pLacIRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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