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Rosetta (DE3)pLysS 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號:CC96112

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

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標(biāo)簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡介
Rosetta 系列菌株來源于 BL21 系列宿主菌,該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細(xì)胞密碼
子,增加了真核細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。Rosetta(DE3)pLysS 來源于 Rosetta(DE3),菌株能夠提供
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA 稀有密碼子的 tRNA。Rosetta(DE3)pLysS 載體通過提供稀有
密碼子,使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌,能夠提供更加通用的蛋白質(zhì)表達(dá),從而提升目的蛋
白表達(dá)水平。DE3 是溶源性的 λDE3, 所以帶有 T7 RNA 聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于 pET
列載體,及其他 T7 啟動(dòng)子系列載體。含有 pLysSRARE2 質(zhì)粒,能夠產(chǎn)生 T7 溶菌酶,可以有效降低
目的基因的基礎(chǔ)表達(dá)水平,該質(zhì)粒具有氯霉素抗性。pLysSRARE2質(zhì)粒的起始復(fù)制位點(diǎn)是p15 Origin,
這使得該質(zhì)粒能夠和 pUC-pBR322-衍生的質(zhì);ハ喙泊。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta(DE3)pLysS
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLysSRARE2 (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
pLysSRARE2 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90 s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min
4. 向離心管中加入900 μL LBSOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預(yù)熱),然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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