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Rosetta感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào):CC96139

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

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Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞具有氯霉素抗性,補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的 6 種稀有密碼子(AUA,AGG,AGA
CUA,CCCGGA)對(duì)應(yīng)的 tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平,該
菌株染色體整合了 λ 噬菌體 DE3 區(qū)(DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶)。Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)
特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:FompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE (CamR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
pRARE 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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