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產品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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Origami B 感受態(tài)

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標簽：感受態(tài)

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產品簡介

Origami B系列菌株同樣具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突變，但是該菌株是來源于BL21

的 lacZY 基因突變株。所以 Origami B 系列感受態(tài)細胞是集合 BL21，Tuner 和 Origami 三種細胞株

的優(yōu)點于一身。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同時含有突變，這

使得該菌株能夠更加高效的在細胞質內生成二硫鍵，有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB

和 Gor 基因突變使得質粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無法用于卡那和四環(huán)素抗性

質粒的蛋白表達。Origami B 感受態(tài)細胞來源于含有 lacZY 基因突變的 BL21 菌株，能夠通過 IPTG

高效控制目的基因的表達。經 PUC18 質粒檢測，感受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。

產品組成

組分

Origami B 感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC gor522:: Tn10 trxB (KanR , TetR)

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

無外源質粒 DNA 殘留；

化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；

5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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