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XL2-Blue感受態(tài)

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標簽:感受態(tài) 
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產品簡介
XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株,為Hte (high transformation efficiency)基因型。HteStratagene
開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉化效率及大質粒轉化能力的宿主菌基因型,該基因型使得 XL2-Blue
用于大質粒 DNA 和重組產物的轉化,降低片段大小的偏愛性,多用于文庫構建,并已成功應用于
40 kb 質粒的構建。recA1 endA1 的突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒 DNA 的提取。
hsdSMR 突變導致 EcoK 核酸內切酶系統(tǒng)缺失,增強了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質量。由于攜帶
lacZΔM15 突變,該菌株可用于藍、白斑篩選。此外,該菌株還攜帶四環(huán)素和氯霉素抗性。XL2-
Blue 感受態(tài)細胞經特殊工藝制作,pUC18 質粒檢測轉化效率 108 cfu/μg DNA
產品組成
組分
XL2-Blue 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型TetR Δ(mcrA)183 Hte [F´ {proAB lacIq lacZΔM15 Tn10 (TetR) Amy CamR}] Δ(mcrCB-hsdSMR
mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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