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產(chǎn)品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產(chǎn)品展示

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相關(guān)產(chǎn)品

Stbl4感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96135

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1263

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標簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

Stbl4 電轉(zhuǎn)化大腸桿菌細胞是 Stbl2 細胞的衍生物，非常適合克隆不穩(wěn)定插入物，如逆轉(zhuǎn)錄病毒序列、

直接重復序列和串聯(lián)陣列基因。此外， Stbl4 細胞可用于使用質(zhì)粒衍生載體產(chǎn)生 cDNA 文庫，并能

夠吸收和維持大質(zhì)粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 細胞還含有一個 F’附加體，允

許它們作為單鏈 DNA 的宿主，如 M13mp 克隆載體。由于攜帶 lacZΔM15 突變，因此該菌可用于含

Xgal 和 IPTG 的瓊脂平板上菌落的藍/白斑篩選。mcrA 突變和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允許克隆甲

基化的基因組序列。最后，endA1 突變大大提高了質(zhì)粒產(chǎn)量和質(zhì)量。經(jīng) pUC18 轉(zhuǎn)化檢測，Stbl4 感

受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Stbl4

感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacIqZΔM15

Tn10 (TetR)

存儲條件

-80 ℃保存，請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預熱），然后置于37 ℃搖床復壯45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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