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當前位置：首頁 - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 克隆感受態(tài) -GT115 感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產(chǎn)品展示

PRODUCT SHOW

相關(guān)產(chǎn)品

GT115 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96176

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1353

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標簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

GT115 菌株，是專門用來克隆含有發(fā)夾結(jié)構(gòu)（Hairpin）或重復(fù)序列等 DNA 二級結(jié)構(gòu)的基因序列的

大腸桿菌菌株。大腸桿菌中存在一種 SbcCD 蛋白復(fù)合體，可以識別 DNA 發(fā)夾結(jié)構(gòu)，并將其切除；

將 sbcC 和 sbcD 兩個基因突變，便增強了發(fā)夾結(jié)構(gòu) DNA 的穩(wěn)定性。同時在大腸桿菌基因組中引入

uidA(∆MluI)::pir-116，使 GT115 可以表達 π 蛋白，從而讓含有 R6Kg ori 復(fù)制子的質(zhì)粒（如 pCpG

mcs、pCpG-LacZ、pCpG-siRNA等）可以在該菌株中正常復(fù)制。該菌株還含有具有核酸酶 (endA)突

變、重組酶 (recA)突變，因此可以增強外源 DNA 的穩(wěn)定性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，GT115 感受

態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

GT115

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ∆M15∆lacX74 recA1 rpsL (StrR ) endA1 ∆dcm uidA (∆MluI)::pir-116

∆sbcC-sbcD

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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