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當(dāng)前位置：首頁 - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 克隆感受態(tài) -EPI400 感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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EPI400 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96177

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1326

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標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

EPI400 來源于 EC100 菌株，將 EC100 核基因中控制質(zhì)�？截悢�(shù)的 pcnB 基因改造成誘導(dǎo)型啟動子驅(qū)

動后獲得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以顯著降低大部分質(zhì)粒的拷貝數(shù)，特別適合于各種含不穩(wěn)

定 DNA 的質(zhì)粒或含有毒性基因的克�。辉诩尤� CopyMore 400 誘導(dǎo)劑后可將質(zhì)粒的拷貝數(shù)提高至正

常狀態(tài)。mcrA 突變和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧

啶或甲基腺嘌呤的 DNA 。recA1和 endA1突變有利于插入 DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA的提取。

lacZΔM15 標(biāo)記的存在使 EPI400 可用于藍(lán)白斑篩選，tonA 突變賦予其抗噬菌體 T1 和 T5 的能力，

rpsL 突變賦予其鏈霉素抗性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，EPI400 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107

cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

EPI 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL

(StrR) nupG trfA tonA pcnB dhfr

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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