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DH12S 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號:CC96128

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格: ¥ 電議

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標(biāo)簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡介
大腸桿菌 DH12S 來源于 DH10B,可用于生產(chǎn)特別純的單鏈 DNA;同時(shí),M13KO7 輔助噬菌體可
用來生成單鏈 DNA。由于該菌株是 endA+基因型,其所生產(chǎn)的單鏈 DNA中很少污染雙鏈 DNA。在
F'中表達(dá)的 LacI 蛋白可以調(diào)控 lac 啟動子的表達(dá)。此外,由于消除了 mcrA,mcrBC,mrr,hsdRMS
等限制系統(tǒng),該菌株可以高效地克隆大部分基因組序列。DH12S 帶有 lacZΔM15 突變,可以進(jìn)行藍(lán)
白斑篩選實(shí)驗(yàn)。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,DH12S 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分 
DH12S
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 ΔlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 deoR Δ(ara, leu)7697 araD139 galU galK rpsL
F' [proAB+ lacIqZΔM15]
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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