艾草网亚洲AV无码专区国产乱码久久_国产一级 片内射毛片中出91_为爱痴狂在线观看日本_隔壁放荡的人妻在线看中文_老司机午夜精品视频在线观_亚洲午夜先锋影院_亚洲国产成人精品无码区二本_美女裸体免费网站黄网_一级α爰做片免费观看_无码av孕妇专区

無外泌體胎牛血清適用外泌體研究，無支原體，無內(nèi)毒素。胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）是大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)重要的生長支持物。天然來源的FBS會(huì)含有大量的外泌體（exosome）等囊泡（Extracellular Vesicles）成分。由于FBS來源的外泌體會(huì)對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生巨大干擾，因此，外泌體研究時(shí)必須使用去除外泌體后的FBS進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

細(xì)胞在正常含血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定的時(shí)間后，細(xì)胞融合度約為 60%-70%時(shí)，移去原有含血清的培養(yǎng)基，換成新鮮的無外泌體胎牛血清，繼續(xù)培養(yǎng) 48h 左右，細(xì)胞融合度達(dá)到80%-95%左右時(shí)收取上清,該上清液即可用于提取外泌體。

制備

無外泌體胎牛血清的制備：用0.22um的濾膜過濾胎牛血清，濾液置于超高速離心管中，4℃，120000g超高速離心90min，收集上清液。

應(yīng)用

無外泌體胎牛血清可用于犬MSC來源外泌體的分離：用10％無外泌體胎牛血清、1％雙抗、1％L-谷氨酰胺和88％DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制完全培養(yǎng)基，以制得的完全培養(yǎng)基傳代培養(yǎng)MSC，取第3-5代收集上清在4℃，300g離心10min除去死細(xì)胞；收集上清后在4℃，16500g離心20min除去細(xì)胞碎片；收集上清后用0.22um的濾膜過濾；收集上清后在4℃，120000g超高速離心90min；去上清后，用生理鹽水重懸沉淀，再次以4℃，120000g超高速離心90min；去上清后，用生理鹽水重懸沉淀，收集懸液即為犬MSC外泌體制劑。