L-15液體培養(yǎng)基的介紹

背景及概述^[1]

液體培養(yǎng)基是培養(yǎng)基中不含瓊脂、明膠或凝固血清、蛋清等輔形劑，由水和可溶性營養(yǎng)成分組成的培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基常用于增菌培養(yǎng)，生化試驗(yàn)或觀察某些細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征，如鼠疫桿菌的鐘乳石樣發(fā)育、炭疽桿菌的絮狀沉淀生長等。胨水是組成最簡單的液體培養(yǎng)基，其次是肉浸湯培養(yǎng)基，后者又是組成固形培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。普通肉湯、蛋白胨水、糖發(fā)酵管等統(tǒng)稱為液體培養(yǎng)基。在獲得細(xì)菌純培養(yǎng)后常用這些培養(yǎng)基作進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。液體培養(yǎng)基接種時應(yīng)注意使接種菌與培養(yǎng)液體調(diào)和，使細(xì)菌混勻于液體培養(yǎng)基中。

一般于接種后18～24h觀察結(jié)果�；蛴^察其生長情況，注意是否均勻混濁，或有無顆粒沉淀、菌膜、產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、顏色與特殊氣味等。L-15液體培養(yǎng)基成分為900mg/LD-半乳糖，300mg/LL-谷氨酰胺，550mg/L丙酮酸鈉，pH值7.0-7.4；或含10%胎牛血清，900mg/LD-半乳糖，300mg/LL-谷氨酰胺，550mg/L焦葡萄酸鈉，pH值7.0-7.4。L-15液體培養(yǎng)基長期放置，需要2-8度避光保存，請勿低溫凍存。其中添加的L-谷氨酰胺會有一定的半衰，長期放置后使用發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長變慢請?zhí)砑覮-谷氨酰胺，來維持細(xì)胞的正常代謝。如果多人使用，建議分裝成100ml或250ml的規(guī)格，以防止使用過程中交叉污染。含有一定量的NaHCO3的L-15液體培養(yǎng)基暴露在空氣中PH值會上升，培養(yǎng)基的顏色會由桃紅變微紫，可使用Hepes鹽調(diào)節(jié)到正常PH范圍再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。