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Origami B 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號:CC96144

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格: ¥ 電議

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標簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡介
Origami B系列菌株同樣具有Origami系列菌株含有的trxB/gor基因突變,但是該菌株是來源于BL21
lacZY 基因突變株。所以 Origami B 系列感受態(tài)細胞是集合 BL21Tuner Origami 三種細胞株
的優(yōu)點于一身。在 thioredoxin reductase (trxB)glutathione reductase (gor)基因上同時含有突變,這
使得該菌株能夠更加高效的在細胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。TrxB
Gor 基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性,所以本菌株無法用于卡那和四環(huán)素抗性
質(zhì)粒的蛋白表達。Origami B 感受態(tài)細胞來源于含有 lacZY 基因突變的 BL21 菌株,能夠通過 IPTG
高效控制目的基因的表達。經(jīng) PUC18 質(zhì)粒檢測,感受態(tài)細胞的效率可達 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Origami B 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 ahpC gor522:: Tn10 trxB (KanR , TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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