1. 產(chǎn)品名稱：大鼠乳鼠心肌細(xì)胞

2. 組織來源：心臟組織

3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105 cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4. 細(xì)胞簡介：

大鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官，主要功能 是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室 、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通 ，心房與心室之間有瓣膜(房室瓣)，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。 心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì) ，并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等)，使細(xì)胞維持正常的代謝和 功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀；細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h 左右，細(xì)胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后，大部分伸出偽足、 呈巴掌狀，部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng)；心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，在體外不增殖。體外培 養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn)，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng)，且心肌細(xì)胞的培 養(yǎng)具有簡便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞 在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體 下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及 從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對(duì)于研究其生理 功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5. 方法簡介：實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105 cells/瓶。

 6. 質(zhì)量檢測(cè)：、實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒 定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7. 培養(yǎng)信息： 包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等，換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液 0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 大鼠心肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基 及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。 二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài) 發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

 三、使用方法 大鼠心肌細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)程梭形、多角形，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操 作流程 下，細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。 客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

 1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度 的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

 2. 貼壁細(xì)胞傳代

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng) 瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變 圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

 4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。

3. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 因原代細(xì)胞貼壁特殊性，原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿 (如玻璃爬片、培養(yǎng) 板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒 貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2 )，多聚懶氨酸PLL(0.1mg/ml)， 明膠(0.1%)， 依據(jù)細(xì)胞種類而定 。

四、注意事項(xiàng)

 1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

 2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

 4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù) 部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑�因，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡 告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

 5. 該細(xì)胞只可用于科研。 備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司