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C58C1感受態(tài)

產(chǎn)品貨號:CC96313

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

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產(chǎn)品簡介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,它能夠
感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。C58C1 發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有 pRiA4b
農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(薔薇科,夾竹桃科,豆科,茄科,黃芩,煙草等),同
時具有鏈霉素,利福平抗性。本公司生產(chǎn)的 C58C1 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,
pCAMBIA2301 質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測,轉(zhuǎn)化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
C58C1
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes (StrR ,RifR ) pRiA4b (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒 pRiA4b 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,置于冰水浴中;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,用手撥打管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5
鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍)、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘;
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時;
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3.C58C1 具有鏈霉素、利福平抗性,不可用于具有鏈霉素抗性或利福平抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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