當前位置：首頁 - 產品中心 - 感受態(tài) - 根癌農桿菌感受態(tài) -EHA105感受態(tài)

產品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產品展示

PRODUCT SHOW

相關產品

EHA105感受態(tài)

產品貨號：CC96301

產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1297

在線詢價

標簽：感受態(tài)

商品詳情
說明書下載
相關文獻

產品簡介

EHA105 菌株由 EHA101 菌株改造而來，為 C58 型背景，核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基

因 Rif，為了便于轉化操作，此菌株攜帶一無自身轉運功能的琥珀堿型 Ti 質粒 pEHA105

(pTiBo542DT-DNA)，此質粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件，

pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質粒自身的 T-DNA 轉移功能被破壞，但可以幫助轉入的雙元載體 T

DNA 順利轉移)。EHA105 菌株適用于水稻、煙草等植物的轉基因操作。本公司生產的 EHA105 化

學轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng) pCAMBIA2301 質粒檢測轉化效率≥104 cfu/μg DNA。

產品組成

組分

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：C58 (RifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

除琥珀堿型 Ti 質粒 pEHA105 外，無外源質粒 DNA 殘留；

化學法轉化效率≥104 cfu/μg DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，用手撥打管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液

氮冷凍 5 分鐘（或干冰乙醇浴和-80 ℃冰凍）、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；

3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時；

4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB

平板上，倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天（當平板只含有 50 μg/ml Kan 時，28℃培養(yǎng) 48h 即可；平板

中同時加入 50 μg/ml Kan，20 μg/ml Rif 時，需 28℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要

28℃培養(yǎng) 72-90 h）。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl，利福平濃度過高不利于農桿菌生長，會降低其生長速度和轉化效率。

4. 由于 Ti 質粒丟失的概率極低（可以忽略），所以相關抗性基因可以不用添加。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

在線留言

您感興趣的產品*		您還沒有輸入您感興趣的產品
您的單位*		您還沒有輸入您的單位
聯(lián)系人*		您還沒有輸入聯(lián)系人
聯(lián)系電話*		您還沒有輸入聯(lián)系電話
詳細地址		您還沒有輸入詳細地址
常用郵箱*		您輸入的郵箱格式不正確
請輸入您的意見或建議*		您還沒有輸入您的意見或建議
驗證碼*		您還沒有輸入驗證碼

EHA105感受態(tài)

在線留言

產品目錄

業(yè)務咨詢