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產(chǎn)品分類：

Nexell細胞系/株 Nexell原代細胞 Nexell細胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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相關產(chǎn)品

GV3101（pJlC SA-rep）感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96308

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價格： ￥電議

點擊次數(shù)：1355

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標簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

GV3101(pJIC SA_Rep)菌株為 C58 型背景，核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因 Rif，為了

便于轉化操作，此菌株攜帶一無自身轉運功能的胭脂堿型 Ti 質粒 pMP90 (pTiC58DT-DNA)，此質

粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)質粒自身

的 T-DNA 轉移功能被破壞，但可以幫助轉入的雙元載體 T-DNA 順利轉移)。pMP90 (pTiC58DT

DNA)型 Ti 質粒含有篩選標簽：Gent，賦予 GV3101 菌株慶大霉素抗性；在 GV3101 菌株中轉入

help 質粒：pJIC SA_Rep 即為 GV3101(pJIC SA_Rep)菌株，可幫助 pgR106，pgR107，pGreen，pGs2

系列質粒在農(nóng)桿菌中復制，同時賦予該菌株四環(huán)素（Tet）抗性。適用于擬南芥、煙草、玉米、土

豆等植物的轉基因操作。本公司生產(chǎn)的 GV3101(pJIC SA_Rep)化學轉化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，

pGs2 (卡那霉素抗性)質粒檢測轉化效率≥ 103 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

GV3101(pJIC SA_Rep)

化學感受態(tài)細胞

10 ×100 μL

100 ×100 μL

定制

基因型：C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( GentR) Nopaline(pJIC SA_Rep -TetR)

存儲條件

-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

除胭脂堿型 Ti 質粒 pMP90 和 pJIC SA_Rep 質粒外，無外源質粒 DNA 殘留；

化學法轉化效率≥103 cfu/μg DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，用手撥打管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分

鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；

3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時；

4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板

上，倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天（當平板只含有 50 μg/ml Kan 時，28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可；平板中同

時加入 50 μg/ml Kan，20 μg/ml Rif 時，需 28 ℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28 ℃

培養(yǎng) 72-90 h）。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl，過高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉化效率。

4.因為 Ti 質粒丟失的概率極低（可以忽略），所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時不考慮添加相應抗生素。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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