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當(dāng)前位置：首頁(yè) - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 表達(dá)感受態(tài) -Tuner（DE3）感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產(chǎn)品展示

PRODUCT SHOW

相關(guān)產(chǎn)品

Tuner（DE3）感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96180

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1052

在線詢價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株，此突變導(dǎo)致 IPTG 以均一

速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個(gè)細(xì)胞，產(chǎn)生更加嚴(yán)格、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達(dá)克

隆于含有噬菌體 T7 啟動(dòng)子的表達(dá)載體 (如 pET 系列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA

聚合酶，該區(qū)整合于 Tuner 的染色體上，所以稱為 Tuner(DE3)，可同時(shí)表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸

桿菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由

特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá) 107 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 λ(DE3)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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