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公司地址: 上海奉賢區(qū)環(huán)城東路323號8樓
細胞背景:
來源于一名 52 歲男性肥大細胞白血病患者的外周血樣本。該細胞有多重亞型分別為:HMC- 1 5C6 ,HMC-1.1 ,
細胞特性:
形態(tài):淋巴母細胞樣,懸浮生長。用途:僅供科研使用
培養(yǎng)條件:
1) 準備 IMDM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 空氣,95%;二氧化碳,5% 。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%
懸浮細胞參考:
大多數(shù)懸浮細胞對于環(huán)境比較敏感,建議一直維持高密度生長,一般情況下細胞密度維持在 1×10 5 到 1×10 6 個/mL(不同細胞對密度要求不同) 。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 800-1000rpm,離心 5min,棄去 上清,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按 1:2 的比例(首次可以 1:1 分瓶)分到新 T25 瓶中,添加 5-6ml 按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2 和以上比例 進行。大多數(shù)血液類相關(guān)的懸浮細胞受運輸影響比較大,會出現(xiàn)一批死細胞,如果因此密度降低了,可以離心后 轉(zhuǎn)移至 T25 瓶中豎著培養(yǎng),培養(yǎng)基添加 5ml 以提高總體密度,隔一天后觀察密度可以的話再補液 3ml 完全培養(yǎng)
基后 T25 瓶放倒,等沉淀穩(wěn)定后觀察細胞密度,持續(xù)添加培養(yǎng)基等密度上升足夠傳代為止
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