當(dāng)前位置：首頁(yè) - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 表達(dá)感受態(tài) -Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

產(chǎn)品展示

PRODUCT SHOW

相關(guān)產(chǎn)品

Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96118

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1333

在線詢價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

商品詳情
說明書下載
相關(guān)文獻(xiàn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Rosetta-gami B 系列菌株來源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列、Rosetta 系列菌株和

Origami 系列菌株的優(yōu)點(diǎn)，極大的增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真

核細(xì)胞蛋白的表達(dá)能力。本菌株含有 pRARE 質(zhì)粒，能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA,

AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA，增加了真核細(xì)胞的在大腸桿菌中的蛋白

表達(dá)水平。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得

該菌株能夠更加高效地在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵，有助于表達(dá)含二硫鍵的活性蛋白。pRARE 質(zhì)粒帶

有氯霉素抗性，同時(shí)基因 trxB 和 gor 的突變使得該菌株具備了卡那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無(wú)法

用于含氯霉素、卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株是來源于

Origami B 系列菌株，其中 DE3 是溶源性的 λDE3, 所以帶有 T7 RNA 聚合酶的染色體拷貝。該菌株

適用于 pET 系列載體，及其他 T7 啟動(dòng)子系列載體。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè)，Rosetta-gami B(DE3)

感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Rosetta-gami B(DE3)

化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F– ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR, KanR, TetR)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pRARE 質(zhì)粒外，無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

在線留言

您感興趣的產(chǎn)品*		您還沒有輸入您感興趣的產(chǎn)品
您的單位*		您還沒有輸入您的單位
聯(lián)系人*		您還沒有輸入聯(lián)系人
聯(lián)系電話*		您還沒有輸入聯(lián)系電話
詳細(xì)地址		您還沒有輸入詳細(xì)地址
常用郵箱*		您輸入的郵箱格式不正確
請(qǐng)輸入您的意見或建議*		您還沒有輸入您的意見或建議
驗(yàn)證碼*		您還沒有輸入驗(yàn)證碼

Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)

在線留言

產(chǎn)品目錄

業(yè)務(wù)咨詢