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人卵巢癌相關(guān)成纖維永生化細(xì)胞

產(chǎn)品貨號:BH3438

產(chǎn)品規(guī)格:5*105

產(chǎn)品價格: ¥3500

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細(xì)胞來源國內(nèi)建系
細(xì)胞鑒定免疫熒光鑒定已通過
細(xì)胞背景:卵巢癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一,全球發(fā)病率高,2020年新發(fā)病例超過300萬,死亡率高,死亡人數(shù)超過200萬。細(xì)胞減縮手術(shù)聯(lián)合鉑類化療被認(rèn)為是晚期卵巢癌患者的最佳治療方案,然而,大多數(shù)接受一線鉑化療的卵巢癌患者最終會發(fā)展為鉑耐藥或鉑難治的復(fù)發(fā)性卵巢癌,癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)是具有功能異質(zhì)性的活化成纖維細(xì)胞,一部分CAFs通過與癌細(xì)胞或衍生細(xì)胞因子的直接交流,在上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)和化療耐藥中發(fā)揮關(guān)鍵作用。

該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
細(xì)胞特性:
形態(tài):成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長。
用途:僅供科研使用
培養(yǎng)條件:
1) 準(zhǔn)備成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;
注意事項(xiàng):1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mL,T752-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

4)運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。

 

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