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產(chǎn)品分類(lèi)：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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相關(guān)產(chǎn)品

Rosetta 2(DE3)感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96185

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1342

在線詢價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

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Rosetta 系列菌株來(lái)源于 BL21 系列宿主菌，該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細(xì)胞密碼

子，增加了真核細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。Rosetta 2(DE3)來(lái)源于 Rosetta(DE3)，本菌株含有 pRARE2 質(zhì)

粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密

碼子的 tRNA 外，還提供了第七個(gè)稀有密碼子 CGG 的 tRNA，這使得該宿主菌相對(duì)于其他大腸桿

菌，能夠提供更加“通用”的蛋白質(zhì)表達(dá)，從而提升目的蛋白表達(dá)水平。DE3 是溶源性的 λDE3 序列,

可表達(dá)T7 RNA聚合酶，因而適用于pET系列載體，及其他T7啟動(dòng)子系列的載體。值得注意的是，

pRARE2 質(zhì)粒具有氯霉素抗性。Rosetta 2(DE3)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化

效率達(dá) 108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Rosetta 2(DE3)

感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB– mB–) dcm gal (DE3) pRARE2 (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL, argX)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pRARE2 外，無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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