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當(dāng)前位置：首頁(yè) - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 表達(dá)感受態(tài) -Origami（DE3）感受態(tài)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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相關(guān)產(chǎn)品

Origami（DE3）感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96178

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1235

在線詢價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Origami 系列菌株是大腸桿菌 K12 的衍生菌，在 trxB 和 gor 基因上同時(shí)含有突變，這使得該菌株能

夠更加高效地在胞內(nèi)生成二硫鍵，有助于表達(dá)含二硫鍵的活性蛋白。該菌株含有 λDE3 序列，由

lacUV5 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng) T7 RNA 聚合酶的表達(dá)。Origami 系列菌株的感受態(tài)細(xì)胞具有卡那霉素和四環(huán)素

抗性，能夠用于氨芐抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá)，尤其是和 pET32a 載體能夠完美搭配使用。pET32a 載體

含有 thioredoxin (TRX)融合標(biāo)簽，能夠高效提升胞質(zhì)內(nèi)蛋白二硫鍵的形成。Origami 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)

特殊工藝制作，經(jīng) pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)，其轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Origami (DE3)

感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsLF [lac+ lacIq pro]

λ(DE3) gor522::Tn10 gorB (KanR, TetR)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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