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產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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Origami 2 (DE3) pLysS感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96114

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1348

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標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Origami 2 系列菌株是由 K-12 菌株衍生而來(lái)，在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase

(gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得該菌株能夠更加高效地表達(dá)含二硫鍵的蛋白。與 Origami 系列菌

株相比，Origami 2 對(duì)卡那抗生素敏感，因而能夠用于含卡納抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。該菌株攜帶的 gor

基因突變使得其和原來(lái)的 Origami(DE3)菌株一樣具有四環(huán)素抗性。該菌株含有溶源的 λDE3 序

列，可表達(dá) T7 RNA 聚合酶，因而適用于 pET 系列及其他 T7 啟動(dòng)子系列載體。該菌株含有的

pLysS 質(zhì)粒（氯霉素抗性）能夠產(chǎn)生 T7 溶菌酶，可以有效降低目的蛋白的本底表達(dá)水平。pLysS

質(zhì)粒的起始復(fù)制位點(diǎn)是 p15 Origin, 這使得該質(zhì)粒能和 pUC-及 pBR322-的衍生質(zhì)粒共存。經(jīng) pUC18

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè)，Origami 2 (DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/μg DNA 以上。

產(chǎn)品組成

組分

Origami 2 (DE3)pLysS

感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100μL

100 × 100μL

定制

基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F ’ [lac+ lacIq pro] (DE3) gor522::Tn10

trxB pLysS (CamR, StrR, TetR)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存，請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pLysS 質(zhì)粒外，無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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