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Origami 2 (DE3)感受態(tài)

產(chǎn)品貨號:CC96116

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

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標簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡介
Origami 2 系列感受態(tài)細胞是 K-12 細胞的衍生而來,在 thioredoxin reductase (trxB)glutathione
reductase (gor)基因上同時含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,有助
于表達含二硫鍵蛋白的活性蛋白。Origami 2 (DE3) 菌株染色體整合了 λ 噬菌體 DE3 區(qū) (DE3 區(qū)含有
T7 噬菌體 RNA 聚合酶)適合 T7 啟動子誘導(dǎo)的蛋白表達。Rosetta-gami 2(DE3)菌株具有氯霉素,鏈
霉素,四環(huán)素抗性,經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,Origami 2 (DE3)感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 108
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分 
Origami 2 (DE3)
化學(xué)感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F′[lac+ lacIq pro] (DE3) gor522 ::Tn10
trxB (StrR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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