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NovaBlue (DE3)感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào):CC96125

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

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標(biāo)簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
NovaBlue(DE3)來源于 K12 菌株,具有極高的轉(zhuǎn)化效率,是轉(zhuǎn)化效率最高的原核表達(dá)菌株,可同時(shí)
用于普通質(zhì)粒的構(gòu)建和蛋白的原核表達(dá)。NovaBlue(DE3)菌株染色體 DNA 中整合了噬菌體 λDE3
列,使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。NovaBlue(DE3)
菌株具有四環(huán)素抗性,endA1 recA1 的突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提。
lacZΔM15 突變使得 NovaBlue(DE3)可用于藍(lán)、白斑實(shí)驗(yàn)篩選。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),NovaBlue
(DE3)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
NovaBlue(DE3)
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- [proA+B+ lacI q ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12- mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,請(qǐng)勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語純生物科技有限公司

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