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C43(DE3)感受態(tài)

產品貨號：CC96167

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產品簡介

C43(DE3)菌株均起源于 BL21(DE3)，其優(yōu)點是可以高效表達毒性蛋白或疏水性蛋白。C43(DE3)跟

BL21(DE3)的區(qū)別在于其能夠高效表達毒性蛋白。C43(DE3)含有 DE3區(qū)序列，可表達 T7 RNA聚合酶，適

用于 pET系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達。經 pUC18質粒轉化檢測，C43(DE3)感受態(tài)細胞的轉化

效率可達 108 cfu/μg DNA。

產品組成

組分

C43(DE3)

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)

存儲條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

除 pRARE 外，無外源質粒 DNA 殘留；

化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；

5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；

2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；

3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司