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當(dāng)前位置：首頁(yè) - 產(chǎn)品中心 - 感受態(tài) - 表達(dá)感受態(tài) -Lemo21(DE3)

產(chǎn)品分類：

Nexell細(xì)胞系/株 Nexell原代細(xì)胞 Nexell細(xì)胞培養(yǎng)液感受態(tài) 定制培養(yǎng)基微生物智能冷鏈箱血液制品細(xì)胞培養(yǎng)耗材 Nexell輔助試劑

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相關(guān)產(chǎn)品

Lemo21(DE3)

產(chǎn)品貨號(hào)：CC96169

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥360

點(diǎn)擊次數(shù)：1187

在線詢價(jià)

標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

大腸桿菌 Lemo21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞為 T7 可控表達(dá)菌株，專為表達(dá)具有挑戰(zhàn)性的重組蛋白而設(shè)計(jì)。

它作為 BL21(DE3)的衍生菌株，不僅繼承了其特點(diǎn)，還能夠通過(guò)改變 T7 溶菌酶（lysY）的水平以

控制表達(dá)水平，T7 溶菌酶為 T7 RNA 聚合酶的天然抑制劑。對(duì)蛋白表達(dá)的精準(zhǔn)控制使得

Lemo21(DE3)成為表達(dá)膜蛋白、毒性蛋白、分泌蛋白以及存在可溶性問(wèn)題蛋白的理想選擇。

Lemo21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

Lemo21(DE3)

感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：fhuA2 [lon] ompT gal (λ DE3) [dcm] ∆hsdS/ pLemo(CamR)

λ DE3 = λ sBamHIo ∆EcoRI-B int::(lacI::PlacUV5::T7 gene1) i21 ∆nin5

pLemo = pACYC184-PrhaBAD-lysY

產(chǎn)品特性

-BL21(DE3)的增強(qiáng)型菌株；

- 精準(zhǔn)的表達(dá)調(diào)控；

- 在 T7 菌株中表達(dá)范圍最寬；

- 消除了形成包涵體的潛在可能。

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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