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產(chǎn)品分類：

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ArcticExpress(DE3) pRARE2)感受態(tài)

產(chǎn)品貨號：CC96183

產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格： ￥電議

點(diǎn)擊次數(shù)：1277

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標(biāo)簽：感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

ArcticExpress (DE3) pRARE2 來源于 ArcticExpress (DE3)，將具有氯霉素抗性的 pRARE2 質(zhì)粒導(dǎo)入

ArcticExpress (DE3)細(xì)胞中即是 ArcticExpress (DE3) pRARE2。ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株染

色體 DNA 中整合了 λ 噬菌體 DE3 區(qū)，使得 ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株可同時(shí)表達(dá) T7 RNA

聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶，廣泛用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。

ArcticExpress (DE3) pRARE2 菌株具有四環(huán)素，慶大霉素，氯霉素抗性；endA1 突變有利于質(zhì)粒

DNA 的穩(wěn)定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3) pRARE2 可以表達(dá)適應(yīng)低溫的伴侶

蛋白 Cpn10 和 Cpn60（來自嗜冷菌—Oleispira antarctica）。Cpn10 和 Cpn60 伴侶蛋白在 4-12 ℃表現(xiàn)

出較高活性，在 ArcticExpress(DE3) pRARE2 細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，可降低重組蛋白包涵體的形成，增加

可溶重組蛋白的表達(dá)量及生物活性，比傳統(tǒng)的原核表達(dá)伴侶蛋白 GroEL、GroES 等具有更加優(yōu)異的

促融能力。同時(shí)，pRARE2 質(zhì)粒可補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的 7 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA,

CCC, GGA 和 CGG)對應(yīng)的 tRNA，提高外源基因的表達(dá)水平。吐露港生產(chǎn)的 ArcticExpress (DE3)

pRARE2 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá) 108cfu/μg DNA。

產(chǎn)品組成

組分

ArcticExpress(DE3)pRARE2

感受態(tài)細(xì)胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型：E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] pRARE2

(CamR)

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

除 pRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司

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