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XL1-Blue MRF Kan 感受態(tài)

產(chǎn)品貨號(hào):CC96155

產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul

產(chǎn)品價(jià)格: ¥ 電議

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標(biāo)簽:感受態(tài) 
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
XL1-Blue MRF'Kan 菌株來(lái)源于 XL1-Blue 株系,屬于限制酶系統(tǒng)缺失型菌株,且具有卡那霉素抗性
(KanR)recA1endA1基因的突變有利于插入外源DNA片段的穩(wěn)定性和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
hsdR17 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,同樣提高了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。
lacIqZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于藍(lán)、白斑篩選實(shí)驗(yàn)。XL1-Blue MRF'Kan 感受
態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
XL1-Blue MRF' Kan
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:(mcrA)183 (mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F'proAB
lacIqZ∆M15 Tn5 (KanR)]
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min
4. 向離心管中加入 900μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者:上海語(yǔ)純生物科技有限公司

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