人胰腺癌細胞HPAF II是從靜置培養(yǎng)的HPAF-1細胞中增殖而來，具有無限增殖能力的自發(fā)性變體。細胞表達Muc 1和Muc 4粘蛋白基因，并高分泌Muc 1粘蛋白。它們是多形性的，在培養(yǎng)過程中可能會發(fā)生一些自發(fā)的分化。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果為陰性。經本庫STR檢測結果無誤。STR結果如下：D5S818: 11,13；D13S317: 12；D7S820: 10,13；D16S539: 11,13；vWA: 17；THO1: 9；Amelogenin: X；TPOX: 6,8；CSF1PO: 10,11

細胞特性

1） 來源：白人 男 胰腺

2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1) 準備MEM 基礎培養(yǎng)基                        86 %

     特級胎牛血清                                              10 %

     MEM NEAA非必需氨基酸                       1%

     Sodium Pyruvate丙酮酸鈉                      1%

     GlutaMAX-1谷氨酰胺                               1%

     P/S青霉素-鏈霉素                               1%

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司