儲存條件：2 ~ 8 ℃

產(chǎn)品簡介

iPS細胞消化液可以應(yīng)用于非飼養(yǎng)層依賴的iPS傳代，該工作液屬于非酶類溫和消化液，對細胞損傷小且消化時間適中便于操作，是一種已被普遍使用的消化液，可與iPS培養(yǎng)基搭配使用。

操作說明

1、消化前，準(zhǔn)備 37 ℃預(yù)熱好的無鈣鎂PBS 溶液及消化液，完全培養(yǎng)基。

2、吸走上清，并加入37℃預(yù)熱好的PBS 溶液清洗1次。

3、加入適量（按 6 孔板每孔加 1mL，6cm 皿加 2mL，10cm 皿加 3mL 的量）的 37℃預(yù)熱好的消化液。

4、37℃放置1-2min，用手指輕彈皿/板/瓶身，顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離培養(yǎng)皿/板底，克隆內(nèi)部大部分細胞成團脫落。

5、加入適量的完全培養(yǎng)基終止消化。

6、移入離心管，300g離心5min。

7、吸出培養(yǎng)基，確保細胞團完整。

8、然后緩慢加入1mL完全培養(yǎng)基，用手指輕彈離心管底部，使細胞團脫離底部并分散。

9、傳代比例為 1：6—1：8，根據(jù)最終培養(yǎng)細胞的液體體積，加入ROCK inhibitor Y27632，終濃度為10μM。

10、將培養(yǎng)皿/板/瓶置于37℃培養(yǎng)箱中，每天更換培養(yǎng)基（換液不需要再添加Y27632，但培養(yǎng)基需提前預(yù)熱）。

 注：

1.吹吸的力度要輕柔，吹打脫落和吹吸混勻的次數(shù)總共不超過10次為宜。吹打過度導(dǎo)致大量單細胞出現(xiàn)是造成細胞分化或死亡的重要原因。

2.若有少量細胞無法從皿底脫落，屬于正�，F(xiàn)象，需延長消化時間。

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

原創(chuàng)作者：上海語純生物科技有限公司