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公司郵箱:yuchunbio@163.com
公司地址: 上海奉賢區(qū)環(huán)城東路323號(hào)8樓
產(chǎn)品貨號(hào):B0172
產(chǎn)品規(guī)格:5ml
產(chǎn)品價(jià)格: ¥
點(diǎn)擊次數(shù):197
在線詢價(jià)規(guī)格:5mL
儲(chǔ)存條件:-20ºC
鑒于基質(zhì)膠的操作環(huán)境要求比較嚴(yán)格,為保證您的實(shí)驗(yàn)順利,特此對(duì)以下幾個(gè)方面進(jìn)行溫馨提示:
1. 收貨時(shí),首先確認(rèn)還有干冰,Matrigel成固態(tài),液面水平,如有異常請(qǐng)及時(shí)拍照取證并聯(lián)系我們。
2. 整個(gè)Matrigel只能分裝一次,在分裝前,要先放4℃冰箱(最好先把Matrigel插在冰上,然后放入4℃冰箱)過(guò)夜,且分裝用的槍頭、EP管等都要提前-20℃預(yù)冷(基質(zhì)膠在10℃以上會(huì)發(fā)成膠凝固導(dǎo)致基質(zhì)膠報(bào)廢),整個(gè)分裝過(guò)程都需在冰上進(jìn)行,且以后每次試驗(yàn)時(shí)拿出本次用量所需的基質(zhì)膠。
3. 實(shí)驗(yàn)人員手心不要接觸基質(zhì)膠,如:要手持裝有Matrigel的EP管的上方,防止體溫使基質(zhì)膠成膠凝固。
4. Matrigel的稀釋比例建議為100倍稀釋。
本庫(kù)建議的配制Matrigel工作液方法:
1. 稀釋前將Matrigel放入4℃冰箱過(guò)夜融化。
2. 將適量體積的稀釋液(DMEM/F12或PBS)置4℃冰箱預(yù)冷。
3. 將融化的Matrigel與稀釋液從冰箱中取出并打開(kāi)蓋子,用移液管吹吸稀釋液幾次以冷卻移液管,并吸取少量稀釋液加入Matrigel管中混勻,將Matrigel轉(zhuǎn)移到稀釋液中,并吹打混勻。(因?yàn)?/font>Matrigel遇15℃以上溫度就會(huì)成凝膠粘在原裝玻璃壁和移液管壁上,故Matrigel從冰箱拿出來(lái)以后盡快打開(kāi)蓋子并轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的稀釋液中,吸取Matrigel的移液管一定要冷卻)。
4. 立即用稀釋后的Matrigel包被培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿。對(duì)于6孔板,每個(gè)孔使用1mL稀釋后的Matrigel,對(duì)于6cm的培養(yǎng)皿,每個(gè)孔使用2mL稀釋后的Matrigel,晃動(dòng)培養(yǎng)板使Matrigel溶液均勻的分布在表面上。
5. 使用前,包被的培養(yǎng)板應(yīng)放在培養(yǎng)箱(37℃)下至少1h。請(qǐng)勿讓培養(yǎng)板脫水。在培養(yǎng)板可供使用之前,請(qǐng)勿移除Matrigel溶液。
如果不立即使用,培養(yǎng)板必須密封,以防止脫水。包被后的培養(yǎng)板可在2-8℃下最多儲(chǔ)存7天。
如果Matrigel溶液并未完全覆蓋表面,則無(wú)法實(shí)驗(yàn)最佳的細(xì)胞培養(yǎng),因此,不建議使用含有溶液已蒸發(fā)區(qū)域的培養(yǎng)板。
如果已將培養(yǎng)板在2-8℃下儲(chǔ)存,則在移除Matrigel溶液之前,將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱(37℃)下放置30min。
注意事項(xiàng)
1. 收貨時(shí),首先確認(rèn)還有干冰,matrigel matrix成固態(tài),液面水平,如有異常請(qǐng)及時(shí)拍照取證并聯(lián)系我們;
2. 整個(gè)matrigel matrix只能分裝一次,在分裝前,要先放在4℃冰箱(最好先把matrigel matrix插在冰上,然后放入4℃冰箱)一段時(shí)間待之融化(切記不要放在冰箱門(mén)上或者是經(jīng)常要敞開(kāi)口取放試劑的冰箱),且分裝用的槍頭、EP管等都要提前-20℃預(yù)冷(因?yàn)榛|(zhì)膠在10℃以上即會(huì)發(fā)生成膠凝固導(dǎo)致基質(zhì)膠報(bào)廢),整個(gè)分裝過(guò)程要在冰上進(jìn)行,且以后每次實(shí)驗(yàn)時(shí)拿出本次用量的已經(jīng)分裝好的基質(zhì)膠用,該次實(shí)驗(yàn)用不完的基質(zhì)膠要扔掉,不可以留作下次使用;分裝時(shí)不做稀釋?zhuān)栽盒问奖4妗?/font>
3. 實(shí)驗(yàn)人員的手心不要接觸基質(zhì)膠,如:要手持裝有matrigel matrix的EP管的上方,防止體溫使基質(zhì)膠成膠凝固;
4. 普通matrigel matrix的濃度是8-12mg/ml,高濃度的matrigel matrix的濃度是18-22mg/ml,具體濃度可通過(guò)貨號(hào)查詢;
5. 以24孔板為例,做腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)時(shí)每孔加入matrigel matrix 20-30ug(一般配成200-300ug/ml的工作濃度,然后每孔加入100ul即可)。此時(shí),matrigel matrix是稀釋到很低的倍數(shù)(有的實(shí)驗(yàn)需要低至30倍稀釋?zhuān)唧w最適濃度需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。)鋪膠后置于37℃培養(yǎng)箱放置1小時(shí),取出后如果上層有液態(tài)培養(yǎng)基,需小心棄去上層的液態(tài)培養(yǎng)基即可使用(此時(shí)matrigel matrix沉在底部形成一小薄層);
6. 做內(nèi)皮細(xì)胞的成管實(shí)驗(yàn)一般把高濃度的matrigel matrix(18-22mg/ml)稀釋到10mg/ml,由于普通濃度的matrigel matrix(8-12mg/ml)的濃度接近10mg/ml,所以有時(shí)也可用作成管實(shí)驗(yàn);
7. 應(yīng)使用傳代次數(shù)較少,狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn);
以上內(nèi)容非常重要,請(qǐng)務(wù)必重視。
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