產(chǎn)品簡(jiǎn)介

XL-10-Gold 是目前轉(zhuǎn)化效率最高的感受態(tài)細(xì)胞，可用于大質(zhì)�；蛘滟F連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化或構(gòu)建文庫(kù)。XL-10-

Gold 菌株為 Hte (high transformation efficiency)基因型，是可特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力

的宿主菌基因型，已成功應(yīng)用于 40 kb 質(zhì)粒的構(gòu)建。XL-10-Gold 幾乎缺失了所有已知的限制酶切系統(tǒng)，同時(shí)缺

失了核酸內(nèi)切酶(endA)，因此可以提高質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量。同時(shí)，重組酶缺陷型(recA)減少了插入片段的

同源重組概率，保證了質(zhì)粒的穩(wěn)定性。菌株帶有四環(huán)素和氯霉素抗性，并可用于藍(lán)、白斑篩選

實(shí)驗(yàn)。經(jīng) pUC19 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè)，XL-10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA 以上。

產(chǎn)品組成

存儲(chǔ)條件

-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質(zhì)量控制

無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；

化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；

3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90 s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；

4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；

5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；

2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；

3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；

4. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。

原創(chuàng)作者：上海語(yǔ)純生物科技有限公司