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Cas12a 核酸酶(舊稱(chēng) Cpf1)是依賴(lài)于 RNA 介導(dǎo)的內(nèi)切核酸酶,在靶標(biāo) DNA 存在 PAM 的情況下, 可特異地切割靶標(biāo)雙鏈 DNA。與 Cas9 不同:(1)Cas12a 只需要單個(gè) crRNA,且體積更小、更易 被遞送至細(xì)胞中;(2)Cas12a 切割后產(chǎn)生粘性末端,更利于基因組精確編輯;(3)Cas12a 的切 割位點(diǎn)遠(yuǎn)離其識(shí)別位點(diǎn),為連續(xù)多次編輯提供了可能性;(4)Cas12a 識(shí)別的 PAM 序列與 Cas9 不 同,因此提供了不同編輯位點(diǎn)的選擇;針對(duì)不同的 Cas12a 蛋白,其識(shí)別靶標(biāo)所需的 PAM 位點(diǎn)不 同,其中部分 Cas12a 蛋白識(shí)別 TTN 位點(diǎn),部分 Cas12a 蛋白識(shí)別 TTTN 位點(diǎn)。本產(chǎn)品中(包括 Cas12a 酶)都不含任何除 Cas12a 外的任何其它核酸酶活性。
注:利用本品進(jìn)行分子診斷的實(shí)驗(yàn)過(guò)程可參考 HOLMES 體系(https://doi.org/10.1038/s41421-018-0028-z)。
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