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小鼠血清采用健康小鼠血液為原料，經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過濾后而成，性狀為澄清液體，無(wú)噬菌體、低內(nèi)毒素，無(wú)溶血無(wú)異物無(wú)細(xì)菌真菌支原體霉形體衣原體等，適用于試驗(yàn)室或生化科研相關(guān)試驗(yàn)，滿足不同科研實(shí)驗(yàn)的多種需求。

小鼠血清可用于1.動(dòng)物免疫、血清IgG制備。2.病理組化封閉、ELISA等免疫實(shí)驗(yàn)中的封閉及保護(hù)劑的使用。3.細(xì)胞體外培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

小鼠血清來源于非免疫的小鼠宿主，經(jīng)過脂質(zhì)萃取和含NaN3的PBS溶液透析，改善其透明度。在病理組化封閉中推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配成5%-20%的工作液，直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。

在細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)細(xì)胞用的培養(yǎng)基為人工合成，但動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，加入動(dòng)物血清是為了給體外培養(yǎng)的細(xì)胞提供一個(gè)類似生物體內(nèi)的環(huán)境，此外動(dòng)物血清中也包含了一些動(dòng)物的激素和酶,可以促進(jìn)細(xì)胞的發(fā)育。主要作用有：

1、提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或合成培養(yǎng)基所缺乏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：如氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等；

2、提供有利于細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所需的激素、生長(zhǎng)因子；

3、提供貼壁細(xì)胞所需的貼壁因子和擴(kuò)展因子；

4、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用，使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷；

5、血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖�謝解毒中起重要作用；

6、血清中的結(jié)合蛋白還可消除某些毒素和金屬對(duì)細(xì)胞的毒性作用。

應(yīng)用[4][5]

用于瑞香素對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞免疫抑制效果及其作用機(jī)制的研究

選用具有較低毒性和潛在免疫抑制活性的DAP進(jìn)行后續(xù)免疫抑制作用的研究。研究旨在研究DAP對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞的免疫抑制作用和基本機(jī)制。

前期研究證明在體外，DAP能夠抑制ConA和LPS誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞的增殖反應(yīng)，提示其對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)有直接的抑制作用。細(xì)胞增殖主要是通過細(xì)胞周期調(diào)控的，細(xì)胞周期由不同的連續(xù)的階段（G0/G1，S，G2/M）組成。使用碘化丙啶染色法分析細(xì)胞周期分布情況，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，隨著DAP濃度的增加，處于G0/G1期的細(xì)胞數(shù)增加，處于S期和G2/M期的細(xì)胞數(shù)則減少，說明DAP是在G0/G1期阻斷DNA合成來抑制小鼠淋巴細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞過度增殖。細(xì)胞因子是免疫系統(tǒng)重要的調(diào)節(jié)劑和效應(yīng)劑。

尤其是多種促炎細(xì)胞因子已被證明與多種自身免疫性疾病有關(guān)。在本研究中，我們使用的ConA作為T細(xì)胞有絲分裂原，選擇Th1型細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ和Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-6用于檢測(cè)DAP對(duì)Th1和Th2細(xì)胞的影響。

結(jié)果表明，DAP可以顯著抑制ConA誘導(dǎo)的小鼠脾細(xì)胞主要細(xì)胞因子分泌和mRNA的表達(dá)，提示其抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生的作用環(huán)節(jié)在mRNA表達(dá)階段。這些研究表明，DAP的免疫抑制作用與抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生與分泌有關(guān)系。

細(xì)胞內(nèi)Ca2+是一種典型的細(xì)胞內(nèi)信使，它的許多細(xì)胞效應(yīng)是通過鈣調(diào)蛋白（CaM）轉(zhuǎn)導(dǎo)，Ca2+/CaM復(fù)合物調(diào)節(jié)多種下游目標(biāo)包括蛋白質(zhì)激酶和磷酸酶。

其中，與免疫相關(guān)的最重要的兩條途徑是受CaM調(diào)節(jié)的CaN-NFAT途徑和CaMKⅡ-NF-κB途徑。

參考文獻(xiàn)

[1]Biochemical and biological studies on 2-desamino-2-methylaminopterin,an antifolate the polyglutamates of which are more potent than the monoglutamate against three key enzymes of folate metabolism.Rosowsky A,Galivan J,Beardsley G P,Bader H,O’Connor B M,Russello O,Moroson B A,DeYarman M T,Kerwar S S,Freisheim J H.Cancer Research.1992

[2]Suppressive effect of mizoribine on progression of bovine serum albumin nephritis in mice.Chen X M,Aozuka S,Kobayashi Y.Nihon Jinzo Gakkai shi.1987

[3]Therapeutic potential of B and T lymphocyteattenuator expressed on CD8+T cells for contact hypersensitivity.Nakagomi D,Suzuki K,Hosokawa J,et al.Journal of Investigative Dermatology.2013

[4]Dysregulated phosphorylation of Ca(2+)/calmodulin-dependent protein kinase II-αin the hippocampus of subjects with mild cognitive impairment and Alzheimer’s disease.Reese Lindsay C,Laezza Fernanda,Woltjer Randall,Taglialatela Giulio.Journal of Neurophysiology.2011